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免疫球蛋白的金屬螯合色譜分離

2021-12-28

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免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)具有抗體活性,是脊椎動物在對抗原刺激的免疫應(yīng)答中,由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的,能與相應(yīng)的抗原發(fā)生特異性結(jié)合的或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的一類球蛋白。它普遍存在于哺乳動物的血液、組織液、淋巴液和體外分泌液中,是主要的液體免疫物質(zhì)。1890年,德國學(xué)者Behring和日本學(xué)者北里shou次發(fā)現(xiàn)免疫球蛋白。隨后人們用電泳技術(shù)證明了血液中抗體的活性存在于γ區(qū)、β2區(qū)、β區(qū)和α區(qū)。為了避免名稱上的混亂,1964年WHO命名委員會統(tǒng)一將抗體和一些化學(xué)結(jié)構(gòu)、抗原性與其有關(guān)的蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白。免疫球蛋白廣泛應(yīng)用于開發(fā)新型功能性食品添加劑,仔畜飼料以及生物新藥和醫(yī)藥生化診斷、檢測試劑等,已經(jīng)成為研究和商業(yè)等部門重要的物質(zhì)。所以免疫球蛋白的純化也備受關(guān)注。

● 由于免疫球蛋白對金屬螯合色譜的親和力更大,因此可采用增加上樣量使其突破飽和點再用強洗脫液洗下吸附的免疫球蛋白。據(jù)報道,此法得到的免疫球蛋白的純度可達(dá)95%,活力幾乎沒有損失。

● 金屬螯合色譜是一種利用金屬離子與蛋白質(zhì)中的某些氨基酸,如組氨酸等特有的親和力進行分離純化的新型色譜分離技術(shù),它具有條件溫和,分離的蛋白質(zhì)活性回收率較高。同時操作較為簡單,具有較高的處理能力,使用壽命也較長,適宜于生物活性蛋白的分離純化。

● 月旭推出的Chelating Tanrose 6FF金屬螯合親和介質(zhì),由亞氨基二乙酸(IDA)偶聯(lián)到瓊脂糖而成,相當(dāng)于未螯合Ni離子的Ni Tanrose 6FF(IDA)。Chelating Tanrose 6FF介質(zhì)的配基可提供3個配位位點同金屬離子螯合,同時提供三個離子鍵結(jié)合部位高親和的純化目的蛋白,親和力要強??蓮V泛應(yīng)用于分離提純蛋白質(zhì)和多肽。其原理是利用蛋白質(zhì)的組氨酸、半胱氨酸和色氨酸的側(cè)鏈與多種過渡金屬離子如Cu2+,Zn2+,Co2+,F(xiàn)e3+的相互作用,從而達(dá)到分離純化的目的。

技術(shù)參數(shù)

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