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一分鐘了解離子交換層析介質!

2021-04-16

離子交換色譜分離蛋白質是根據(jù)在一定pH條件下,蛋白質所帶電荷不同而進行的分離方法,由基體、配基(離子官能團)和反離子三部分組成。填料的物理性質有:

具備合適的顆粒大小和較窄的粒度分布范圍;

具備一定的機械強度;

多孔結構,有一定的孔徑大小和良好的孔徑分布;

填料的溶脹或收縮現(xiàn)象不能超出所允許的限制范圍;

親水性,不會對樣品有不可逆吸附。

01 基體

基體是填料中的固體支持物部分,賦予填料一定形狀,同時讓配基固著或鍵合在上面形成色譜填料?;w一般是多孔的、有一定剛性的固體顆粒。

無機材料比如硅膠和多孔玻璃類基體,耐壓高、孔徑可控、可制備高效填料,但由于易使蛋白質失活和大孔硅膠價格昂貴而主要用于分析。

有機材料的基體分兩類:高分子聚合物和聚多糖類。高分子聚合物主要包括苯乙烯和二乙烯基苯聚合物、聚甲基丙烯酸酯和聚酰胺,耐壓較高,但疏水性強,孔徑不好控制,一般不用于蛋白質制備。聚多糖類主要包括纖維素、葡聚糖和瓊脂糖,這類基體表面電荷呈中性,有大量羥基,親水性強,生物相容性好,孔徑易控制,制得的填料柱容量大,但機械強度差,經(jīng)過交聯(lián)后可以使強度提高。

02 配基(離子官能團)

配基是固定在基體骨架上的功能基團,它是帶電荷的基團(強離子交換劑)或是在溶液中可以離解成帶電荷基團的官能團(弱離子交換劑)。

①強陰離子交換劑(SAX),如帶三J胺基乙基的季銨鹽型(簡稱Q型);

②強陽離子交換劑(SCX),如磺酸基丙基(簡稱SP);

③弱陽離子交換劑(WCX),如羧甲基(簡稱CM),在一定的pH范圍內(nèi)可離解成羧基陰離子(-CH2COO-);

④弱陰離子交換劑(WAX),如二乙胺基乙基(簡稱DEAE),在一定pH范圍內(nèi)可結合質子離解成季氨陽離子[(CH3CH2)2N+H(CH2)2-]。

03 反離子

與帶電功能基團帶相反電荷,可以移動,能與帶電樣品分子進行交換的離子稱為反離子或抗衡離子(也稱為平衡離子)。反離子與固定的帶電基團的電荷相反,二者之間以靜電力相結合。反離子的存在有兩種情況:在強離子交換劑中它已存在;在弱離子交換劑中反離子要在一定的pH溶液中才離解形成。

04 月旭離子交換層析介質

Q/SP/DEAE/CM Tanrose FF快流速瓊脂糖基架離子交換介質

1.jpg

技術參數(shù)

2.jpg

以及:

Q/SP Tanrose HP高分辨率瓊脂糖基架離子交換介質;

Q/SP Tanrose XL高載量瓊脂糖基架離子交換介質;

Q/SP Tanrose BB大顆粒瓊脂糖基架離子交換介質;

Solid Q/S/DEAE高剛性瓊脂糖基架離子交換介質;

Solid Q/SP Mustang高分辨率剛性瓊脂糖基架離子交換介質;

Solid MMC復合型弱陽離子交換介質;

Solid MIX A復合型強陰離子交換介質;

Solid MMC/MIX A Mustang高分辨率復合型離子交換介質;

DEAE/CM Tandex葡聚糖基架離子交換介質。

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